Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Другое -> Лакович Дж. -> "Основы флуоресцентной спектроскопии" -> 115

Основы флуоресцентной спектроскопии - Лакович Дж.

Лакович Дж. Основы флуоресцентной спектроскопии — М.: Мир, 1986. — 496 c.
Скачать (прямая ссылка): osnovifluriscentnoyspektroskopii1986.djv
Предыдущая << 1 .. 109 110 111 112 113 114 < 115 > 116 117 118 119 120 121 .. 185 >> Следующая

ра и донора соответственно . Для дансил-ь-пролил-а-нафтила, в котором донор и акцептор расположены близко, эффективность переноса энергии составляет 100%. Для этой донорно-акцепторной пары наибольшая чувствительность спектра возбуждения к переносу энергии наблюдается при 290 им - максимуме поглощения нафтолового донора. Для других производных эффективность переноса имеет промежуточное значение и зависит от длины прокладки из ь-пролина. Эффективность переноса энергии определенно уменьшается с увеличением длины прокладки.
3,0 3,2 3,4 3,6 3,8 4,0
in г
70 20 30 -Ю SO
Расстояние, Л
О
РИС. 10.5. Зависимость эффективности переноса энергии в дансил(Ь-пролип)-а, нафтиле от расстояния (« = 1 - 12).
(С разрешения авторов работы [ 11].)
Целью этих экспериментов было определение зависимости безызлучатель-ного переноса энергии от расстояния. Следовательно, было принято, что эффективность переноса энергии зависит от расстояния в соответствии с уравнением
где R и г имеют их обычный смысл, а / - показатель степени, который необходимо определить из наблюдаемой зависимости Б от г. Преобразование уравнения (10.14) дает
Следовательно, график зависимости lg {Е~* - 1) от lg г имеет наклон /
(рис. 10.5). Наклон равен 5,9 ±0,3 [ 11, 12]. Из этого превосходного соответствия с предсказываемым значением j = 6 авторы работ [11, 12] заключили, что перенос энергии описывается теорией Фёрстера. В этих экспериментах поляризация акцептора, возбуждаемого за счет переноса энергии, была равна пулю, даже когда она измерялась в застеклованном растворителе. Это указывает на разупорядочивание поляризации в ходе переноса энергии и корректность использования к2= 2/3. Важным аспектом рассматриваемых экспериментов яв-
(10.14)
(R0/r)>\-1
- 1)-/ lgr -/ Lg R0
(10.15)
ляется наличие жесткой прокладки между донором и акцептором. Если бы прокладки были гибкими, то существовало бы распределение расстояний между донором и акцептором, что сильно усложнило бы анализ. Более того, если бы прокладка не была жесткой, то расстояние между парами донора и акцептора могло бы меняться в течение времени жизни возбужденного состояния, что также могло бы привести к значительному усложнению анализа данных. В разд. 10.4 будет показано, как такие усложняющие обстоятельства могут быть учтены при использовании кинетики затухания флуоресценции донора.
В работе [13] проверялась зависимость скорости переноса энергии в первой степени от интеграла перекрывания. Эти эксперименты обсуждаются в задаче 10-1 в конце главы.
10.2. Измерение расстояний методом переноса энергии
В предыдущем разделе была описана теория, пригодная в случае фиксированного расстояния между донором и акцептором. Измерение скорости переноса энергии позволяет вычислить расстояние между донором' и акцептором -метод, широко используемый в биохимических исследованиях. Превосходный пример применения флубресцентного переноса энергии для определения расстояния между различными связывающими центрами белка можно найти в работе [ 14]. При подходящих обстоятельствах по этим расстояниям можно сделать выцод о форме белка и локализации связывающих центров. Был изучен родопсин - фоторецепторный белок пластинчатых мембран в палочках сетчатки глаза позвоночных. Хромофорной областью родопсина является 11-^мс-ре-тиналь. Хромофор (ретиналь) изомеризуется при поглощении света, и это служит сигналом поглощения фотона. Максимум поглощения находится при 500 нм, т.е. в области, благоприятной для проявления ретиналем акцептирующих свойств по отношению к большому числу флуорофоров.
Родопсин маркировали в трех различных точках (А, Б и В) семью различными флуорофорами (рис. 10.6). Каждый из этих флуорофоров мсрет дониро-вать энергию ретиналю с R находящимся в диапазоне 33 - 51 А. Эффективность переноса энергии измерялась и по относительным квантовым выходам в отсутствие (Qb) и в присутствии акцептора, и по временам затихания ть и (присутствие акцептора указывается индексом d). Под воздействием света ретиналь обесцвечивается (индекс Ь), и исчезает его полоса поглощения при 500 нм (рис. 10.7). Это благоприятное обстоятельство позволяет измерять времена затухания и квантовые выходы в отсутствие переноса энергии просто по обесцвечиванию акцептора. Вслед за обесцвечиванием ретиналя времена затухания и квантовые выходы всех доноров возросли (табл. 10.2). Была получена совершенно одинаковая эффективность переноса и по временам затухания, и по измерению квантового выхода. Во всех случаях эффективность была низкой,
- Положение
В
н н
I I
N-CH2-CHg-N-C-CH2-I
Н Н
I I
so; n-ch,-ch,-n-c-ch2-i
. 3 , *¦ *¦ н
о
0,S-N-H H-N-SO. 2 1 I z
HC-COO'
Предыдущая << 1 .. 109 110 111 112 113 114 < 115 > 116 117 118 119 120 121 .. 185 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама