Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Другое -> Лакович Дж. -> "Основы флуоресцентной спектроскопии" -> 119

Основы флуоресцентной спектроскопии - Лакович Дж.

Лакович Дж. Основы флуоресцентной спектроскопии — М.: Мир, 1986. — 496 c.
Скачать (прямая ссылка): osnovifluriscentnoyspektroskopii1986.djv
Предыдущая << 1 .. 113 114 115 116 117 118 < 119 > 120 121 122 123 124 125 .. 185 >> Следующая

(анцвтг/ор/(россро/типид)
РИС. 10.13..Графическое представление вычисленной эффективности переноса энергии для донорнсьакцепторных пар [17].
Указанные расстояния — это значения RQ для переноса энергии; (акцептор/фосфолипид) — мольная доля акцептора по отношению к фосфолипиду. (С разрешения American Chemical Society.)
энергии с вычисленной. Если измеренная эффективность превышает вычисленное значение, то это указывает на предпочтительное сближение доноров и акцепторов внутри мембраны. Противоположная картина должна наблюдаться в случае изоляции доноров от акцепторов в различных областях мембраны. Подчеркиваем, что вычисленные значения строго справедливы только для переноса энергии между донором и акцептором, иммобилизованными на одной стороне планарного бислоя. Однако эта простая модель, как утверждают, является хорошим приближением и для сферических бислоев [7]. Для малых значений /?о перенос через бислой несуществен.
Интересно также проанализировать кинетику затухания флуоресценции донора в присутствии акцептора (рис. 10.14). Затухание начинает заметно отличаться от экспоненциального, особенно при высоких концентрациях акцептора. Это связано с зависимостью от времени распределения акцепторов вокруг возбужденных доноров. В течение короткого времени, следующего за возбуждением, еще существуют доноры с близко расположенными акцепторами, испуска-
*/го
РИС, 10.14. Рассчитанная кинетика затухания флуоресценции донора [7].
Вычислено при ItQx 40 А. (С разрешения American Chemical Society.)
ние которых и затухает быстрее из-за близко расположенных акцепторов. Через некоторое время доноры с близко расположенными акцепторами перестают флуоресцировать, и испускание определяется главным образом донорами, вблизи которых пет акцепторов. Время затухания для таких доноров дольше благодаря меньшей скорости переноса энергии. В принципе кинетика затухания флуоресценции содержит большую информацию, но для реализации этой информации требуются высокая точность измерений и усложненная теория. В более общем случае (разд. 10.4) расстояние между донором и акцептором может варьировать как в результате исходного набора расстояний, так и иэ-за диффузии. Оба фактора влияют на скорость переноса энергии, и их необходимо учитывать в такого рода анализах.
10.4. Статическая и динамическая подвижность макромолекул, выявляемая по кинетике затухания флуоресценции донора
Макромолекулы могут существовать в растворе в виде набора конформаций, причем конформация индивидуальной молекулы может изменяться в результате ее сегментальной гибкости. Эти различные явления, называемые ста-
тической и динамической подвижностью, могут быть выявлены при измерении кинетики переноса ‘энергии»
В предыдущих рассуждениях мы полагали, что молекулы донора и акцептора находятся друг от друга на определенном расстоянии, которое остается неизменным и течение времени жизни возбужденного состояния донора. Однако известно много случаев, когда такое предположение неприменимо. Например, рассмотрим молекулы донора и акцептора, расположенные на противоположных концах гибкой полипептидной цени (рис-, 10,15). Следует ожидать, что существует набор расстояний между концами цепи. В жидкостях расстояние между концами может изменяться вследствие диффузии за время жизни возбужденного состояния» Так как скорость переноса энергии зависит от расстояния d -а, можно полагать, что данные по переносу энергии будут отражать й набор расстояний d - а, и скорость диффузии. Важность таких измерений для биохимии очевидна. Широкий диапазон расстояний d - а может указывать на набор центров связывания донора и акцептора. Более того, для маркированных макромолекул скорость диффузии донора в направлении акцептора может отражать зависящие от времени изменения в конформации макромолекулы. В серии изящных экспериментов Стейнберг и соавторы [4, 21 - 23] использовали кинетику затухания флуоресценции донора для определения как вероятности распределения расстояний между концами молекулы, так и коэффициентов диффузии для относительного движения концов макромолекулы. Теория такого анализа относительно сложна, но идеи, лежащие в основе экспериментов, в общем понятны, поэтому результаты будут подробно описаны.
В качестве модельных'соединений были выбраны дансил- и нафтилмарки-ровапные олигомеры /У5-(2-гидрокоиэтил)-ь-глутамата(риси 10Л5). Контрольным соединением, пе содержащим акцептора, служило соединение И. В противоположность прокладке из иоли-ь-иролина, выбранной авторами работы [11], эта гибкая прокладка позволяла донору и акцептору находиться на различных расстояниях друг от друга. Были проведены две серии экспериментов. Первая -в вязком растворителе — глицерине. В нем предполагается существование набора расстояний d - а, но коэффициент относительной диффузии концов мал. Следовательно, на скорость переноса энергии влияет только набор расстояний. Во второй серии экспериментов вязкость глицерина уменьшалась за счет добавления трифторэтанола. При низкой вязкости расстояния донор - акцептор могут значительно изменяться за время жизни возбужденного состояния донора. Этот процесс увеличивает скорость переноса энергии. В сильно вязком растворителе распределение вероятностей расстояний между концами /(г) определялось путем сравнения затухания флуоресценции донора во времени [/(«)! с ожидаемым для предполагаемой вероятности распределения. Для этого необ-
Предыдущая << 1 .. 113 114 115 116 117 118 < 119 > 120 121 122 123 124 125 .. 185 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама