Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Другое -> Лакович Дж. -> "Основы флуоресцентной спектроскопии" -> 13

Основы флуоресцентной спектроскопии - Лакович Дж.

Лакович Дж. Основы флуоресцентной спектроскопии — М.: Мир, 1986. — 496 c.
Скачать (прямая ссылка): osnovifluriscentnoyspektroskopii1986.djv
Предыдущая << 1 .. 7 8 9 10 11 12 < 13 > 14 15 16 17 18 19 .. 185 >> Следующая

1* Интенсивность света от возбуждающего источника является функцией длины волны* Даже если возбуждающий свет пропускают через систему расщепления пучка, показанную на рис* 2*1, и его интенсивность корректируют путем деления (см* выше), отношение'сигналов может зависеть от длины волны.
2* Эффективность монохроматора является функцией длины волны*
3* Оптическая плотность образца может выходить за пределы линейной области, которая охватывает ~ 0,1 единицы оптической плотности и зависит от геометрии образца*
Спектры испускания записывают, выбирая подходящую длину волны возбуждения и сканируя испускание по длинам волн. В добавок к указанным выше факторам спектр испускания искажается еще и вследствие того, что эффективность монохроматора испускания и чувствительность фотоумножителя зависят от длины волны.
Рассмотрим теперь основные характеристики отдельных деталей спект-рофлуориметра, а также причины, по которым выбирают именно эти конкретные устройства.
3-413
2.2. Источники света
КСЕНОНОВЫЕ ЛАМПЫ* Наиболее универсальными источниками света являются ксеноновые (Хе) дуговые лампы высокого давления» Они обеспечивают почти непрерывный спектральный выход в области 270 — 700 нм (рис. 2.3),' за исключением нескольких узких линий вблизи 450 нм. Испускание света ксеноновыми дуговыми лампами происходит за счет рекомбинации электронов с ионизованными атомами Хз. Эти ионы образуются при столкновениях атомов Хе с электронами в дуге. Непрерывный спектр испускания возникает при полном удалении электронов из атомов. Атомы Хе, находящиеся в возбужденном состоянии, дают линии в спектре, а не широкие полосы; этим обусловлены пики вблизи 450 нм. Интенсивность испускания резко падает в области < 280 нм. При работе многих ксеноновых ламп не происходит образования озона в окружающем воздухе. Кварцевый баллон таких безозонных ламп не пропускает света с длиной волны короче 250 нм, и выходной поток таких ламп быстро падает при уменьшении длины волны.
Зависимость излучения ксеноновой лампы от длины волны является основной причиной искажений спектров возбуждения соединений, поглощающих в ультрафиолетовой области. Для иллюстрации величины такого эффекта на рис. 2.4 приведены исправленные и неисправленные спектры возбуждения флуоррсцеина. Неисправленный спектр возбуждения имеет пики в области 450 цм, обусловленные излучением ксеноновой лампы (рис. 2.3).
На рис. 2.4 показан также спектр возбуждения, скорректированный по спектральному выходу ксеноновой лампы, зависящему от длины волны. В канал сравнения был помещен счетчик квантов для получения сигнала, пропорционального интенсивности излучения лампы, на который делилась бы интенсивность свечения образца (разд. 2.7.1). В исправленном спектре возбуждения пики уже отсутствуют; этот спектр больше похож на спектр поглощения флуоресцеина. Заметная разница между исправленным и иеисправ-
Исенон-ртуть
6
Ксенон
560 300 500 700 900 1100
Длина Волны, нм
РИС. 2.3. Спектральные выходы ртутно-ксеноновой (а) и ксеноновой (б) дуговых ламп (воспроизведено из проспекта Kraios).
Длина волны, нм
РИС. 2.4. Неисправленный (1) и исправленный (2) спектры возбуждения флуо-ресцеина (по данным [э]).
ленным спектрами иллюстрирует важность специфических свойств лампы для спектров возбуждения.
Кожухи дуговых ламп выполняют несколько функций. Газ в ксеноиовых лампах находится под высоким давлением (около ~ 10 атм), и поэтому существует опасность взрыва. При работе с такими лампами необходимо надевать защитные очки. К кварцевому кожуху нельзя прикасаться; отпечатки пальцев будут обугливаться, приводя к горячим пятнам на кварце и к возможному повреждению лампы. Если соприкосновение произошло, необходимо протереть кожух растворителем, например этанолом. Кожух служит также для того, чтобы направлять на лампу воздух и удалять избыток тепла и озона* На ксеноновую лампу нельзя смотреть без защиты глаз, так как ослепительно яркий свет может повредить сетчатку глаза, а ультрафиолетовое излучение - роговицу. Полезное время работы ксеноиовых ламп обычно не превышает 2000 ч. Чтобы предотвратить возможность работы с уже использованной лампой, можно обернуть лампу в толстую бумагу и разбить кварцевый баллон.
Источники питания дуговых ламп, производящие ток в 25 А при напряжении 20 В для типичных 450-ваттных ламп, также крайне опасны. Для запуска ламп необходимо напряжение 20 - 40 кВ. Такое напряжение может повредить кожу, а возникающие большие токи при- этом могут быть смертельными.
РТУТНЫЕ (Hg) лампы высокого ДАВЛЕНИЯ, Излучение этих ламп более интенсивно, чем ксеноиовых, но они имеют линейчатый спектр. Обычно необходимо бывает выбрать ту длину волны, которая нужна для данного флуорофора, а не наоборот. Следовательно, такие лампы годятся только в том случае, если ртутные линии имеют подходящую длину волны для возбуждения данного флуорофора.
РТУТНО-КСЕНОНОВЫЕ дуговые лампы имеют более высокие интенсивности излучения в ультрафиолетовой области, чем ксеноновые лампы, а присутствие Хз приводит к более широкому спектральному выходу. Од-нако распределение интенсивности не такое плавное, как у ксеноиовых. ламп (рис. 2.3).
Предыдущая << 1 .. 7 8 9 10 11 12 < 13 > 14 15 16 17 18 19 .. 185 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама