Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Другое -> Лакович Дж. -> "Основы флуоресцентной спектроскопии" -> 150

Основы флуоресцентной спектроскопии - Лакович Дж.

Лакович Дж. Основы флуоресцентной спектроскопии — М.: Мир, 1986. — 496 c.
Скачать (прямая ссылка): osnovifluriscentnoyspektroskopii1986.djv
Предыдущая << 1 .. 144 145 146 147 148 149 < 150 > 151 152 153 154 155 156 .. 185 >> Следующая

Преимущество фазово-модуляционных методов заключается в возможности непосредственного измерения разности фаз между состояниями R и F или демодуляции флуоресценции R относительно F. В зависимости от спектральных свойств флуорофора ото можно осуществить либо методом выбора длин волн, либо с помощью фазочувствительных измерений. Такую возможность иллюстрирует рис. 12.11, где показаны фазовые углы и коэффициенты демодуляции в предположении тех же параметров, которые использовались для обратимой реакции, описываемой рис. 12.10. При непосредственном измерении фазовые углы между состояниями F и R должны были бы быть равны 411,3° для k2 - 0 и 32,1° для k2 ~ 108 о”1. Эти фазовые углы соответствуют при МО МГц временам затухания 5 и 3,33 не соответственно [уравпенио (12.37)], которые получаются из соотношения т R ~ (с R + krJ~\ Непосредственно наблюдаемые коэффициенты демодуляции между состояниями F и R должны были бы быть равны 0,73 для k2 = 0 и 0,85 для =* 1Q8 с-1. Эти значения опять соответствуют временам жизни состояния R 5 и 3,33 не [ уравнение (12.38) ]. Из уравнений (12.41) и (12.42) видно, что измерение величии tg (ф^ -ф^) или ш./и. дает собственное время жизни состояния R, измененное под влия-
1\ Г
ни ем обратимой релаксации.
Во всех рассмотренных выше примерах выбрана разность между состояниями F и R, равная 5 • Ю3 см-1. Это приводит к тому, что легко обнаруживаются области, в которых фазовые и модуляционные времена затухаиия постоянны. Обычно сдвиг спектров, соответствующих двум состояниям, бывает меньше. Влияние меньших сдвигов на предсказываемые величины т m и
РИС. 12.11 о Влияние обратной реакции на измеренные значения фазовых углов и коэффициентов демодуляции.
См. также рис. 12.10, (С разрешения авторов работы [ 13] и North Holland Publishing Co.)
m/cos ф показано на рис. 12.12. Спектральные сдвиги, обусловленные реак-иней, уменьшены до 2,5 • 103 см"1 (рис. 12.12, а) и 1,0 • 103 см~1 (рис. 12.12, б). Штриховые линии вновь соответствуют областям, где интенсивности испускания составляют менее 10% максимальной интенсивности. Поскольку в этих областях трудно получить надежные данные, легко наблюдаемые значения изображены.сплошной линией. По мере уменьшения обусловленного реакцией спектрального сдвига постоянство величин т^, тт и т/cos tp становится менее очевидным. Далее, увеличение перекрывания спектров уменьшает возможность наблюдения соотношений т^ > тт или т/cos9 > 1. Следовательно, перекрывание спектров может мешать получению данных по фазовым углам и коэффициентам демодуляции, которые в противном случае могли бы быть использованы для доказательства протекания реакции в возбужденном состоянии.
РИС. 12.12. Влияние перекрывания спектров на отношение m/oos <р и кажущиеся значения фазового и модуляционного времен затухания.
, Предполагается, что центральная частота для непосредственно возбужденного состояния равна 25 • ^О8 см""\ а частота для релаксированного состояния 22,5 х х Ю3 см-1 (а) и 24 ¦ 103 см”1 (б) , Следовательно,спектральные одвиги составляют 2,5 • 103 и 1,0 х Ю8 см""1 соответственно. Все параметры совпадают с приведенными на рис. 12.7. (С разрешения авторов работы [ 1 з] и North Holland Publishing Co.)
Аналогичная ситуация обнаружена при использовании метода импульсной флуорометрии. Появление отрицательного предэкспоненциального множителя служит доказательством протекания реакции в возбужденном состоянии. Однако наблюдению соответствующего члена может мешать перекрывание спект ров. При этих условиях заманчиво приписать зависимость времен затухания
* » и
от длины волны гетерогенности в основном состоянии. Например, Рос'' /Ч)-
[ 37] объяснили зависимость времен затухания спиртовой гидрогена:ш1 1 полученных импульсными методами, наличием двух различных тринто^‘^ остатков в этой белковой молекуле. Напротив, Лакович и Черек [36] cft>l 1-Ли зависимость от длины волны времени затухания, полученного фазоны^1 rvit'To~ дом, со спектральной релаксацией. В последнем случае не наблюдало^’ ш/cosф > 1, а впервой работе не получен отрицательный предэкспот?,11*'1’15Е1ль-ный коэффициент. Следовательно, изучение этих величин не позволив % Сличить случаи спектральных сдвигов, вызванных реакцией в возбужден!1^ ^ <‘°-стоянии, от гетерогенности как основной причины зависимости врсм<’>* ll*Ty-хания от длины волны. Из результатов модельных исследований, приИ'*^^ -Иных на рис. 12.12, ясно, что перекрывание спектров может мешать при p,r’*lUl нии этих двух разных явлений. Аналогично двухэкспоненциалыюе загУ KUlute флуоресценции триптофана в глюкагоне [38] может быть вызвано либс’ 1 'То-рогенностыо, либо реакцией в возбужденном состоянии. Стало быть, '11,гР^ль-ной проблемой является перекрывание спектров, которое может одел*1"1’1* битные, полученные как импульсными, так и фазово-модуляционными М1'|4)^!1ми, неинформативными для разделения гетерогенности и процессов в во'^’У -^Денных состояниях.
12.5. Протонирование акридина в возбужденном состоянии
Предыдущая << 1 .. 144 145 146 147 148 149 < 150 > 151 152 153 154 155 156 .. 185 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама