Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Другое -> Лакович Дж. -> "Основы флуоресцентной спектроскопии" -> 19

Основы флуоресцентной спектроскопии - Лакович Дж.

Лакович Дж. Основы флуоресцентной спектроскопии — М.: Мир, 1986. — 496 c.
Скачать (прямая ссылка): osnovifluriscentnoyspektroskopii1986.djv
Предыдущая << 1 .. 13 14 15 16 17 18 < 19 > 20 21 22 23 24 25 .. 185 >> Следующая

Вторым главным источником временной зависимости сигналов ФЭУ является сам фотокатод. Обычно его временная характеристика зависит от длины волны падающего света. Это свойство называется цветовым эффектом. Очевидно, энергия эжектируемых электронов зависит от длины волны падающего света. Цветовой эффект не имеет значения при стационарных измерениях, однако может служить источником существенных ошибок при измерениях времен жизни (гл. 3).
2.6. Сравнение методов счета фотонов и аналогового
детектирования флуоресценции
Фотоумножители могут работать либо в аналоговом режиме, либо в режиме счета фотонов. В данном разделе рассматривается стационарный режим регистрации флуоресценции; разрешенные во времени измерения методом счета фотонов будут описаны в гл. 3. В режиме счета фотонов регистрируют и считают отдельные импульсы с анода, обусловленные каждым фотоном. В этом случае система регистрации работает вблизи теоре-
Пролетное время
Ю'8
РИС. 2.11. Зависимость пролетного ^qq ~ времени и времени нарастания от напряжения для типичных фотоумножителей.
1000
Напряжение на ФЭУ, В
тического предела чувствительности. Помимо увеличения чувствительности, можно повысить стабильность системы регистрации. Это результат того, что ФЭУ работает при постоянном высоком напряжении и небольшой дрейф напряжения не приводит к значительным изменениям эффективности счета каждого фотона. По этой причине регистрацию методом счета фотонов часто используют, когда уровни сигналов низки и когда необходимо усреднять периодически повторяющееся сканирование по длинам »оли, с тем чтобы увеличить отношение сигнал/шум. Недостатком метода счета фотонов является то, что нельзя изменять коэффициент усиления ФЭУ путем изменения приложенного напряжения. Другой недостаток метода - ограниченная область интенсивностей, внутри которой скорость счета линейна. Если два импульса поступают на анод с малым интервалом времени, они будут посчитаны как один импульс. Анодные импульсы от одного фотона имеют обычно длительность 10 не. Это ограничивает частоту откликов ФЭУ значением 100 МГц (108 Гц) для периодического сигнала. Для регистрации случайных событий необходимо, чтобы скорость счета была примерно в 100 раз меньше, чтобы избежать одновременного прихода двух фотонов. Следовательно, скорости счета ограничены величиной } МГц или меньше.
В типовых приборах линейность нарушается при скорости счета выше 100 000 фотонов в секунду. Таким образом, регистрация методом счета фотонов неудобна, когда уровни сигналов высоки. Для того чтобы остаться в линейном диапазоне, необходимо регулировать ширину щелей или интенсивности флуоресценции (используя нейтральные фильтры). Кроме того, отношение сигнал/ шум становится неудовлетворительным при скоростях счета ниже 10000 фотонов в секунду. Такая ограниченная область интенсивностей является помехой для регистрации методом счета фотонов в случае стационарных измерений флуоресценции.
В аналоговом режиме отдельные импульсы усредняются. Поскольку ток от каждого импульса вносит вклад в средний анодный ток, одновременный приход импульсов не создает затруднений. При аналоговом детектировании коэффициент усиления системы детектирования можно регулировать изменением либо коэффициента усилителя, либо напряжения на фотоумножителе. Благодаря этому можно регистрировать сигналы в широком диапазоне уровней, но беспокоясь о нелинейности. Кроме того, точность отдельных измерений оказывается выше, чем в методе счета фотонов, в основном из-за более высоких полных уровней сигналов. Заметим, что для высокоточных аналоговых измерений требуются стабильные усилители и высоковольтные блоки питания, однако это в настоящее время не является серьезным ограничением, Для измерений методом счета фотонов такие условия не требуются,
признаки повреждений фотоумножителей. С фотоумножителями надо обращаться очень осторожно. На их внешних поверхностях не должно быть пыли и отпечатков пальцев; эти поверхности нельзя трогать голыми руками. Фотокатод чувствителен к свету, поэтому все манипуляции с ним луч-
4-413
ше проводить в полутьме. Следует знать обычные признаки повреждений ФЭУ. Первый признак - появление импульсов тока, когда приложенное наг пряжение велико. При более низких напряжениях он проявляется как нестабильность сигнала. Например, за период 2 - 20 с коэффициент усиления может измениться на 20% или даже в несколько раз. Причиной этого чао-то, но не всегда, является проникновение газа внутрь трубки ФЭУ, Трубку нельзя ремонтировать и необходимо заменить, В некоторых случаях эта трубка может удовлетворительно работать при меньших напряжениях.
Второй признак - большой темновой ток. Он проявляется как избыточный уровень сигнала, когда никакого света на ФЭУ не попадает. Высокие темновые токи обычно появляются, когда трубка долго подвергается действию света. Наибольшая опасность возникает, если в это время к фотоумножителю приложено напряжение. В этом случае также не существует другого средства, кроме замены ФЭУ или работы при более низких напряжениях.
Предыдущая << 1 .. 13 14 15 16 17 18 < 19 > 20 21 22 23 24 25 .. 185 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама