Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Другое -> Лакович Дж. -> "Основы флуоресцентной спектроскопии" -> 25

Основы флуоресцентной спектроскопии - Лакович Дж.

Лакович Дж. Основы флуоресцентной спектроскопии — М.: Мир, 1986. — 496 c.
Скачать (прямая ссылка): osnovifluriscentnoyspektroskopii1986.djv
Предыдущая << 1 .. 19 20 21 22 23 24 < 25 > 26 27 28 29 30 31 .. 185 >> Следующая

tg<p = сот^; т? = со“^<р (3.6)
т«[1 + а?(т"*)3]-И; ттг «“*[(1 /т2) - 1]» (3.7)
Зависимость интенсивности от времени для этих измерений показана на рис. 3.2, а . Предполагается, что частота модуляции равна 30 МГц, а время модуляции - 9 не. Используя уравнения (3.6) и (3.7), легко можно вычислить, что фазовый угол равен 59,5°, а коэффициент демодуляции составляет 0,5. (Напомним, что со* 2тг * 30 МГц.)
Принципы фазово-модуляционных измерений иллюстрируются графиками 6 и в на рис. 3.2. Здесь представлена зависимость m и <р от времени затухания флуоресценции при ¦ частотах модуляции 10 и 30 МГц. Ясно видно, что
Время, не
г, не г, не
РИС. 3.2. Графическое представление зависимостей в фазовых и модуляционных методах измерения времен жизни,
фазовый угол увеличивается, а коэффициент демодуляции уменьшается при увеличении времени жизни. Для получения измеримых значений <р и т надо использовать частоту модуляции, сравнимую со скоростью гибели. Для поо* тоянного времени жизни увеличение частоты модуляции приводит к большим фазовым сдвигам и к большим значениям степени демодуляции (рис. 3.2).
Некоторые особенности фазово-модуляционных измерений часто служат источниками ошибок, и их следует особо упомянуть. Так, если фазовый угол больше - 70° (либо из-за большого времени жизни, либо из-за высокой чао-тоты модуляции), на расчетное значение фазового времени затухания влияют даже небольшие ошибки в измерениях фазового угла. Это показано на рис. 3.2, а ив, горизонтальными и вертикальными штриховыми линиями.
Для частоты модуляции 30 МГц и времени затухания ~ 5 не неточность в измерении фазового угла в 2° соответствует ошибке примерно 0,35 не в рассчитанном значении времени затухания. Если времена затухания ~20 не, неточность составит 2,8 не. Небольшие систематические погрешности в иэ-
мерениях фазового угла легко могут сделать неверными измерения таких больших времен затухания. Наоборот, измерение коротких времен методом демодуляции часто затруднено. Степень дзмодудяции мала, если время жизни короткое, и даже небольшие ошибки в коэффициенте демодуляции могут привести к тому, что величины тт будут лишены всякого смысла. Например, рассмотрим попытку измерить время затухания 3 не, используя частоту модуляции 10 МГц. Такое время сравнимо с величинами, найденными для флуоресценции триптофапа и белков. Используя уравнение (3.7), легко можно рассчитать коэффициент демодуляции, который будет равен 0,983. Рассмотрим теперь небольшую ошибку в 1 % для этой измеренной величины, т.е. значения либо 0,993, либо 0,973. Такие значения соответствуют временам затухания 1,9 и 3,8 не соответственно* Следовательно, погрешности в 1 % при измерении величины тп может привести к 50 %-ной ошибке в рассчитанных временах затухания. Практические ошибки в измеренных значениях тп, вероятно, превышают 1 %, и, следовательно, когда времена жизни короткие, необходима крайняя аккуратность при измерениях величии тт.
Другая важная особенность фазовых и модуляционных измерений состоит в том) что наблюдаемыми величинами являются фазовый угол и степень демодуляции. Времена затухания не измеряют - их рассчитывают из измеренных значений <р и т* Для одноэкспоненциального затухания имеем
t^j = тт - т (3.8)
где т - действительное значение времени затухания флуоресценции. Однако если закон затухания более; сложный, рассчитанные времена затухания-это только кажущиеся величины. Если такое затухание обусловлено смесью флуорофоров (миогоэкспононциальное затухаиие с положительными пред-зкепонентами), то < тт. Эти результаты будут описаны в разд. 3.7.4. Реакции в возбужденных состояниях могут привести к еще более сложным зависимостям.
Уравнения (3.6) и (3.7) можно вывести несколькими способами. Мы приводим прямой, но алгебраически сложный вывод этих уравнений. Рассмотрим возбуждение образца синусоидально-модулированным светом, зависимость интенсивности которого от времени выражается уравнением
f(t)~a + b sin со ? (3.9)
Степень модуляции света определяется отношением b/а =. mL (рис. 3.2, а). Для полностью модулированного овита Ь ^ а. Испускание флуоресценции вынуждено происходить с той же частотой, но сдвиг но фазе и степень модуляции Moiyr быть иными. Предположим, что
N(t) -- А + В sin (со t ~<р) (3.10)
Ь-413
и определим связь между временем затухания флуоресценции и величинами фазового сдвига (ф) и степени демодуляции (тл).
При условии синусоидального возбуждения уравнение (3.1) преобразуется в
i_N(t) + /(0 <3.11)
Подставив уравнение (ЗЛО) в (3,11), получим
1 U + Я sin (co? -q>)]+a + b sin cot =co#cos(coJ - ф) (3,12) dt т
После математических преобразований получаем а ~(1/т)Л-0 (3.13)
Предыдущая << 1 .. 19 20 21 22 23 24 < 25 > 26 27 28 29 30 31 .. 185 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама