Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Другое -> Лакович Дж. -> "Основы флуоресцентной спектроскопии" -> 27

Основы флуоресцентной спектроскопии - Лакович Дж.

Лакович Дж. Основы флуоресцентной спектроскопии — М.: Мир, 1986. — 496 c.
Скачать (прямая ссылка): osnovifluriscentnoyspektroskopii1986.djv
Предыдущая << 1 .. 21 22 23 24 25 26 < 27 > 28 29 30 31 32 33 .. 185 >> Следующая

Целью описанных выше измерений является выявление изменения интенсивности флуоресценции во времени [F(*)3. Для единственного флуорофора, затухание которого происходит по экспоненциальному закону, находят, что
F(t) - y/V0e~? /т - Fqc"1 /т (3.19)
где F0 - интенсивность флуоресценции в момент времени t * 0. Часто кривые затухания нельзя описать единственной экспонентой. В этих случаях наблюдаемую кинетику обычно можно представить в виде суммы экспонент:
W-2a.e '/т>
где о,- - предэкспоненциальиый коэффициент, определяющий относительный вклад в кривую затухания компоненты с временем затухания т. . Необходимо понимать, что в зависимости от природы исследуемого образца величины ос; и тi могут иметь физический смысл, а могут и не иметь его* Например, затухание флуоресценции может быть неэкспоненциальным, т.е. его нельзя правильно описать суммой экспонент. Неэкспоненциальные законы затухания ожидают и часто наблюдают для флуорофоров, когда происходит либо тушение по механизму переноса энергии, либо процесс релаксации растворителя (гл. 10 и 8). Всегда можно подобрать для измеренного затухания уравнение, аналогичное (3.20), и при этом для описания экспериментально наблюдаемой кривой обычно достаточно двух или трех компонент. В этих случаях подобранные параметры (о,- и т(. ) не обязательно соответствуют какому-либо из спектральных свойств исследуемой мо-
лекулы или образца. Не следует предполагать, что величины а . и т(. представляют собой единственные компоненты для образца» если нет других факторов, подтверждающих такую интерпретацию.
Известен один важный случай, когда величины а- и т,- имеют физический смысл, - это случай смеси ие взаимодействующих между собой флуорофоров. В смеси может быть несколько различных флуорофоров либо один и тот же флуорофор, но в различных окружениях. Такие образцы мы будем рассматривать как неоднородные или обнаруживающие свойство гетерогенности в основном состоянии. Для гетерогенных образцом, в которых затухание каждой частицы подчиняется экспоненциальному закону, общий закон затухания можно описать уравнением (3.20). Времена т. представляют собой времена затухания каждой из индивидуальных частиц. Относительная интенсивность /• для каждого вида частиц определяется выражением
а,- т-
/. » * *---- (3.21)
«i Tf
Таким образом, кинетику затухания флуоресценции можно использовать для того, чтобы обнаружить и исследовать гетерогенное испускание. Однако отметим еще раз, что совпадение наблюдаемого закона затухания с уравнением (3.20) не доказывает того, что действительно существуют отдельные частицы, описываемые подобранными параметрами.
Важным аспектом измерений времени жизни является эффект вращательной диффузии. Использование монохроматоров возбуждения и/или испускания обычно приводит либо к' частичной поляризации возбуждающего света, либо к повышению вероятности наблюдения одной из поляризованных компонент испускания. Если скорость затухания сравнима со скоростью вращательной диффузии, что очень часто бывает для флуорофоров, связанных с биологическими макромолекулами или растворенных в вязких растворителях, тогда затухание индивидуальных поляризованных компонент испускания является миогоэкспоиепциальным (гл. 6). Чтот эффект ие играет роли, если скорость вращательной диффузии либо много меньше, либо много больше скорости затухания, т.е. для стеклообразных или жидких растворов. Один из способов устранения этих эффектов - использование поляризатора для возбуждающего спета, ориентированного вертикально, и поляризатора для испускаемого света, ориентированного под углом 54,7° к вертикали. Важно, что миогоэкспопенциалыюе затухание флуоресценции известно даже для случая единственного флуорофора, затухание которого экспоненциально, если селективно наблюдать индивидуальную поляризованную компоненту. Вращательная диффузия флуорофоров может влиять также на измерения фазово-модуляционным методом.
3.3.1. Импульсные лампы
Импульсные лампы короткой длительности необходимы как в методе счета фотонов, так и в стробоскопическом методе. Эти лампы различаются газом-иаполпителем и бывают "самопроизвольно включающимися" или "запускаемыми”. Тип газа определяет спектральное распределение выгодной мощности лампы. Азот дает множество высокоинтенсивных линий (рис. 3.3). Непрерывный набор линий в ультрафиолетовой области получают, используя водород или дейтерий, но интенсивность таких ламп почти в 10 раз меньше.
В САМОПРОИЗВОЛЬНО ВКЛЮЧАЮЩИХСЯ ИМПУЛЬСНЫХ лампах разряд (и вспышка света) происходят тогда, когда электроды заряжены до напряжения пробоя. Это напряжение зависит от типа газа, его давления, а также точной геометрии межэлектродного промежутка. Число импульсов в секунду определяется емкостью лампы и напряжением пробоя. В результате не имеется возможности независимого управления частотой импульсов. Замена газа, либо изменение давления приводят к изменению частоты. По этой причине самопроизвольно включающиеся лампы неудобны и мало используются в настоящее время. Однако разрабатываются усовершенствованные устройства для работы при постоянной и переменной скоростях повторения (Дж. Игерабид, частное сообщение).
Предыдущая << 1 .. 21 22 23 24 25 26 < 27 > 28 29 30 31 32 33 .. 185 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама