Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Другое -> Лакович Дж. -> "Основы флуоресцентной спектроскопии" -> 29

Основы флуоресцентной спектроскопии - Лакович Дж.

Лакович Дж. Основы флуоресцентной спектроскопии — М.: Мир, 1986. — 496 c.
Скачать (прямая ссылка): osnovifluriscentnoyspektroskopii1986.djv
Предыдущая << 1 .. 23 24 25 26 27 28 < 29 > 30 31 32 33 34 35 .. 185 >> Следующая

РИС. 3.5. Графическое представление импульсного стробоскопического метода (по данным работы [11).
Штриховой линией показана форма вспышки пампы.
вает большее временнбе разрешение. Анодный ток в каждом импульсе измеряется и запоминается в много канальном анализаторе (МКА). После следующей возбуждающей вспышки опять регистрируют испускаемый свет, но уже через другой промежуток времени после возбуждения. После боль-шого числа повторяющихся вспышек получают отдельные участки кривой затухания для различных времен затухания, после чого можно анализировать всю кривую.
Важно отметить, что конечная длительность вспышки ламны приводит к искажению кривых затухания флуоресценции. Это показано па рис. 3.5, где видно, как закругляется максимум и как перекрываются вспышка лампы и испускание флуоресценции. Эти результаты можно сравнить с теми, которые получились бы при 5-образной вспышке (см. рис. 3.1). Способы корректировки данных на конечную величину длительности вспышки будут описаны в разд. 3.4. Отметим также, что в стробоскопическом методе обычно регистрируют много фотонов па один импульс. Фактически необходимо, чтобы испускалось много фотонов, иначе в тот короткий промежуток времени, когда ФЭУ отперт, может вообще ие быть никаких фотонов. Сигналы от этих фотонов усредняются за период длительности стробирующего импульса.
Вместо периодического включения фотоумножителя можно использовать стробирующий электронный осциллограф [ 39]. Принцип его работы аналогичен изображенному на рис. 3.5, за исключением того, что коэффициент усиления ФЭУ постоянен, но сигнал с ФЭУ регистрируют через различные промежутки времени после возбуждающего импульса. Такие приборы непрерывно усовершенствуются, и в настоящее время стробирующие импульсы могут быть очень короткими - например, до 30 пс [ 40]. Эта аппаратура удобна, так как имеется в продаже и непосредственно соединяется с компьютерами. Поэтому можно ожидать, что стробирующие осциллографы будут использовать шире, чем периодически включающиеся фотоумножители.
3.3.3. Метод счета единичных фотонов
Цель метода счета единичных фотонов та же, что и в стробослопи-ческом методе, а именно измерение кривой затухания флуоресценции. Однако здесь используют другой способ регистрации. Образец возбуждают вспышкой света и измеряют интервал времени между вспышкой ламны и попаданием на анод ФЭУ импульса тока. Интенсивность подбирают таким образом, чтобы 'Угот импульс был обусловлен единичным с}хугопом, попадающим па фотокатод. Напомним, что испускание флуоресценции - случайное событие. Если испускается только один фотон, вероятность этого испускания будет в различные моменты времени той же, что и вероятность затухания флуоресценции для большого числа флуорофоров. В методе счета единичных фотонов уровень интенсивное-
ти необходимо подбирать таким образом, чтобы наблюдать не более одного фотона на каждые 20 импульсов.
Интервал времени между вспышкой лампы и анодным импульсом измеряют с помощью время-амплитудного преобразователя (ВАП) (рис. 3.6). Импульс лампы запускает ВАП, который генерирует линейно растущее со временем напряжение. Анодный импульс, обусловленный одиночным зарегистрированным фотоном, запирает ВАП. Напряжение в приборе в момент запирания пропорционально времени между этими двумя событиями. Если не регистрируется никаких фотонов (запирающий импульс), в приборе устанавливается нуль. Зарегистрированные импульсы записываются в цифровой форме в импульсном многоканальном анализаторе амплитуды импульсов (ИМКААИ). Например, если регистрируют фотон, пришедший через 50 не после возбуждающей вспышки лампы, единичный отсчет запоминается в ячейке памяти ИМКААИ, соответствующей 50 не. Ito положение обозначь
А мллигпудныи
100
Г
1*0
1
I W
I
20
I*
1 \
О
100
200
\ не
Номер канала (1 канал* Qp5 8*0,S не)
РИС. 3.6. Схема аппаратуры и графические зависимости в методе смета единичных фотонов.
ВАП — время-амплитудный преобразователь; ИМКААИ — импульсный многоканальный анализатор амплитуды импульсов; АЦП — аналогово-цифровой преобразователь. (С разрешения авторов работы^ 2] И Academic Ргонн, Inc;.)
но стрелкой на рис. 3.6. Такой цикл повторяют до тох пор, пока не будет зарегистрировано большое число фотонов, обычно 10® или больше. Число отсчетов, соответствующих каждому напряжению, генерируемому В АП, представляется в форме гистограммы с помощью ИМКААИ. Эти данные и отражают закон затухания, который, безусловно, искажен конечной длительностью 1 вспышки лампы. В случае, изображенном на рис. 3.6, для каналов с номерами 0 - 10 не было измерено никаких импульсов, поскольку лампа еще не зажглась. Видно, что максимальное число отсчетов находится вблизи канала с номером 30, который примерно соответствует времени максимума возбуждающей вспышки. Момент времени t 0 трудно определить, за исключением случая 5-образной вспышки. Для больших номеров каналов, соответствующих большим временам, число отсчетов меньше.
Предыдущая << 1 .. 23 24 25 26 27 28 < 29 > 30 31 32 33 34 35 .. 185 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама