Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Другое -> Лакович Дж. -> "Основы флуоресцентной спектроскопии" -> 36

Основы флуоресцентной спектроскопии - Лакович Дж.

Лакович Дж. Основы флуоресцентной спектроскопии — М.: Мир, 1986. — 496 c.
Скачать (прямая ссылка): osnovifluriscentnoyspektroskopii1986.djv
Предыдущая << 1 .. 30 31 32 33 34 35 < 36 > 37 38 39 40 41 42 .. 185 >> Следующая

Измеренные значения разности фаз и степени модуляции для любого образца можно использовать для расчета времен затухания, согласно уравнениям (3.6) и (3.7). К сожалению, эти уравнения предполагают, что флуоресценция образца затухает экспоненциально с единственной константой скорости. Если это условие выполняется, уР = тт и представляет собой действительное время затухания. Предположим теперь, что затухание не описывается одной экспонентой. Это утверждение, обычно следует из неэквивалентности величии тР и тт. Для гетерогенного образца [ уравнение (3.20*, в котором все 0], кажущиеся значения фазовых времен затухания, обычно крроче кажущихся значений модуляционных времен. Далее, увеличение частоты модуляции приводит к одновременному уменьшению во личин тР и тт. Обратите внимание, что мы говорим об этих измеренных значениях времен затухания, как о "кажущихся”. При работе с фазово-модуляционным флуорометром важно не забывать о том, что величины тР и тт истолковываются как измеренные значения <р и т*
3.7.1. 'Анализ фазовых и модуляционных данных методом моделирования
Рассмотрим многоэкспоненциальный закон затухания, описываемый уравнением (3.20). Фазовый сдвиг < <р > и степень модуляции т> для такого образца описываются уравнениями
tg < ф > = N/D - сотР (3.39)
< т> ш [/V2 + ™ [ 1 + со2(т«)2ГИ (3.40)
где AU 2 А.я!пф.с0яф. И 08 29. (3.41), (3.42)
Величины ф. представляют собой фазовые углы для отдельных флуорофоров [ 19]. Вклады интенсивностей флуоресценции от каждой компоненты в полное испускание в стационарном состоянии /• связаны с пред'жоио-ноптами а{ уравнением (3.21),, Важно отметить, что уравнения (3.39) -
(3.42) применимы только к случаю гетерогенности в основном состоянии когда т,- г cos ф,- ~(1 -f со^т?)-1^. Для описания процесса в возбужденном состоянии, для которого mi /¦ cos ф,- (гл. 12), требуются бол tie с,лож-
ные выражения. В работе [23] уравнения (3.39) - (3.42) использованы для опенки величин т™ и т? в предположении двухэкспонсшшалыюго затухания, Измеренные при двух частотах, модулянии величины тР и тт сравнивали с рассчитанными значениями, а среднеквадратичное отклонение при этом оценивали по формуле
где &р и ат — оцененные ошибки измерения фазового и модуляционного времен затухания. Это уравнение аналогично тому, которое используют для оценки величины х2 при анализе временного закона затухания. Пока еще слишком рано говорить о том, будет ли этот метод полезен в общем случае.
В противоположность анализу импульсной кинетики затухания флуоресценции в литературе не появилось пока детального описания фазово-модуляционных методов анализа простых смесей флуорофоров. Далее, очевидно, что весовые факторы, используемые в уравнении (3.43), не подходят. Возможно, этот метод необходимо модифицировать, чтобы использовать ошибки в измерении величии < ср > и < т>. Как было показано ранее в этой главе, погрешности в < ср > и < т> не переносятся линейно на ошибки в тР и тт.
3„7„2„ Непосредственный расчет величин а. и т{
Недавно Вебер описал прямой метод расчета величии а,- и т. для /V-экс-поиенциального затухания из известных значений сдвига фаз и степени модуляции, полученных при N частотах модуляции [ 19]. Используемые в этом методе уравнения крайне сложны, поэтому интересующиеся этим вопросом могут обратиться к оригинальной работе Вебера. Такой метод использовали да расчета зависящих от pH времен затухания флуоресценции триптофана [ 20]. При значениях pH, близких к нейтральным, время жизни ивиттер-иоиной формы триптофана составляет 3 не. При pH ~ 10 время жизни отрицательно заряженной формы равно примерно 9 не. При промежуточных значениях pH присутствуют обе формы. Эти формы не переходят друг в друга за время жизни возбужденного состояния, и, следовательно, Т’акие растворы триптофана гетерогенпы в основном состоянии. Из данных о сдвиге фаз и степени модуляции, полученных при двух частотах модуляции, Джеймсон и Вебер смогли рассчитать точные значения at- и т{-Расчетные ошибки при этом были примерно в 10 раз больше погрешностей измерения. Следовательно, экспериментальные данные необходимо получать с большой точностью, так как небольшие систематические ошибки могут сильно исказить результаты.
(3.43)
3„7„3. 'Анализ данных по сдвигу фаз и степени модуляции, полученных при варьируемой частоте
Описаннью выше методики были разработаны для оперирования с ограниченным числом данных, полученных для двух или трех частот модуляции. Широко известно, что возможность использования варьируемой частоты модуляции позволила бы рассчитать импульсные функции отклика. Но поскольку пригодная соответствующая аппаратура пока еще не получила широкого распространения, этой проблеме уделялось мало внимания. В следующих разделах будет приведено описание одного из возможных методов анализа таких данных, который привлекателен своей прямотой. Однако с опытом могут возникнуть и другие методики.
Предыдущая << 1 .. 30 31 32 33 34 35 < 36 > 37 38 39 40 41 42 .. 185 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама