Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Другое -> Лакович Дж. -> "Основы флуоресцентной спектроскопии" -> 40

Основы флуоресцентной спектроскопии - Лакович Дж.

Лакович Дж. Основы флуоресцентной спектроскопии — М.: Мир, 1986. — 496 c.
Скачать (прямая ссылка): osnovifluriscentnoyspektroskopii1986.djv
Предыдущая << 1 .. 34 35 36 37 38 39 < 40 > 41 42 43 44 45 46 .. 185 >> Следующая

Некоторые из удобных эталонных соединений приведены в табл. 3.1, а их спектры испускания изображены на рис. 3.16. Для этих веществ можно добиться высокой степени чистоты; их растворы легко приготовлять, и они устойчивы. Кроме того, на времена затухания этих флуорофоров не влияют тушение кислородом, длина волны регистрации и температура.
Все растворы готовят в этаноле (в продувке инертным газом нет необходимости). Для каждого стандартного раствора можно использовать одно эталонное значение времени затухания в температурном интервале от
Таблица 3„1, Эталонные соединения для фазово-модуляционной флуорометрии (по данным [27])
Соединение Область длин волн, т> Нс* нм
л-Т ерфенил® 310 - 410 1,05
PPI) 310 - 440 1,20
РРО 330 - 480 1,40
РОРОР 370 - 540 1,35
(М<.)2 РОРОР 390 - 560 1,45
аТочность • 0,2 не при 10 и 30 МГц.
® Данные для растворов в абсолютном эталоне; можно использовать одно и то же эталонное "время затухания для интервала температур —55 -f +55°С.,
Длина волны, нм
РИС. 3.16. Спектры испускания флуоресценции короткоживущих эталонных соединений.
(С разрешения авторов работы [ 27] и Elsevier Biomedical Press.)
-55 до+ 55°С при всех длинах,воли. Оптические плотности эталонного раствора и исследуемого образца должны быть примерно одинаковы, чтобы изображения на фотокатодс также были однотипны,
3.9п Оценка характеристик аппаратуры для измерения
времен затухания
Описанные выше цветовые эффекты, а также другие факторы, такие, как стабильность ламп и модуляторов света, могут привести к ошибкам в измерении времен затухания. Без соответствующей проверки данного прибора незадолго до измерений и сразу после них трудно приписать определенный физический смысл параметрам наблюдаемого многоэкспонснциаль-ного закона затухания. Это справедливо как для импульсных, так и для фазово-модуляционных измерений. В предыдущем разделе мы привели описаг ние методов введения поправок на эти эффекты. Однако наиболее надежным методом, позволяющим судить о качестве аппаратуры, является ио следование соединений с известными временами затухания, для которых закон затухания можно описать одной экспонентой. Для таких соединений импульсная аппаратура должна дать только одно время затухания (см. рис. 3.8). При использовании фазово-модуляционной аппаратуры должны по-
I
лучаться-одни и те же значения фазовых и модуляционных времен затухания независимо от частоты модуляции. Конечно, надо рассматривать произведение времени затухания на частоту и ограничения, накладываемые на эти измерения (см, выше рис. 3,2 и связанное с этим вопросом обсуждение).
Для оценки качества аппаратуры удобно иметь набор стандартных соединений с различными временами жизни, В табл. 3,2 приведены соединения, которые мы считает подходящими для этих целей, Для указанных соединений характерен определенный диапазон времен затухания, что является важным аспектом при оценке любого прибора. Например, соединения с малыми временами затухания (NADII и NATA) полезны при импульсных измерениях, когда важно узнать, не вносит ли свертка закона затухания с функцией вспышки лампы каких-либо ошибок в результаты. Такие соединения с малыми временами затухания могут также принести пользу при оценке фазовых измерений, так как короткие времена затухания должны хорошо воспроизводиться с помощью фазовых данных. Эти соединения полезны также при оценке модуляционных измерений. Обычно степень демодуляции слишком мала для получения точных значений модуляционных времен затухания. Однако эти кажущиеся значения времен должны находиться в области вблизи истинного значения. Если это не выполняется, метод модуляции ненадежен для измерений других похожих времен затухания,
В табл. 3.2 мы также приводим ряд эталонных соединений с большими временами затухания, таких, как DENS и хинин, особенно пригодных для критической оценки фазовых измерений. Фазовые углы велики, и поэтому
Таблица 3.2 Эталонные соединения для измерений времен затухания
Соединение Растворитель т, не Литература
N ADIIа Фосфат натрия 0,1 М, pH 7,5; 20 °С 0.4 17, 28
N АТА6 Фосфат натрия 0,1 М, pH 7; 20°С 3,0 32, 33
9-Цианоантра- Абсолютный этанол, в присутствии кис 11,8 2, 27
цен лорода воздуха; 20°С
Хининбисуль- IIaS04 0,1 н; 23°С 18,9 34, 35
фат
1ЖРБ® Трио 0,01 М с КС1 0,05 М, pH 7,5; 20°С 29 27, 36
Затухание N ADH может не быть одноэкспоненциальным ([28]), но он является удобным стандартом с коротким временем затухания.
&
Время затухания NATA зависит от температуры, поэтому необходим тщательный контроль температуры. Во многих лабораториях считают, что затухание N АТА является одноэкспоненциапьным. Затухание триптофана может быть двухэкспоненциальным ([32]), но амплитуда короткоживущей компоненты мала.
Предыдущая << 1 .. 34 35 36 37 38 39 < 40 > 41 42 43 44 45 46 .. 185 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама