Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Другое -> Лакович Дж. -> "Основы флуоресцентной спектроскопии" -> 69

Основы флуоресцентной спектроскопии - Лакович Дж.

Лакович Дж. Основы флуоресцентной спектроскопии — М.: Мир, 1986. — 496 c.
Скачать (прямая ссылка): osnovifluriscentnoyspektroskopii1986.djv
Предыдущая << 1 .. 63 64 65 66 67 68 < 69 > 70 71 72 73 74 75 .. 185 >> Следующая

сот
1
mQ (1 + со V
О (6.35)
Важной особенностью разностных тангенсов является их зависимость от частоты модуляции [22, 27]. Увеличение частоты модуляции повышает значения tgA и сдвигает профиль tgA к большим скоростям вращения (при постоянном времени затухания) (рис. 6.11). Эту зависимость в течение многих лет игнорировали, однако важно помнить, что на фазовом флуорометре измеряются фазовые углы, но не времена затухания. Справедливости ради следует указать, что в ряде работ [ 28 - 31] изучалось влияние вращательной диффузии на кажущиеся времена затухания параллельной (т1( ) и перпен-
РИС. 6.11. Графические зависимости расчетных разностных тангенсов от 2Дт для сферического флуорофора [ 22].
2Ят
дикулярной (tjJ составляющих испускания. Эти кажущиеся времена затухания вычислялись из tgipjj = сотц и tgq>^= сот^. Естественно, затухания /ц («) и IjJt) не являются одноэкспоиенциальными, так как, строго говоря,
Т|, и т^не существуют. В ранних работах эти измеряемые величины были приравнены к среднему времени пребывания в возбужденном состоянии, вычисляемому по формулам
ОО ОО
Г t /ц («) с?г f
т„ = ---------------; =---------------- (6.36), (6.37)
оо оо
Г Iu(t)dt [ L(t)dt
о о
В приведенных формулах нет зависимостей от частоты модуляции. Это корректные выражения для средней продолжительности нахождения в возбужденном состоянии, но нужно помнить, что средняя продолжительность не измеряется фазовым флуорометром. Наши комментарии не означают критики ранних пионерских работ по изучению вращательной диффузии методом фазовой флуоресценции. Скорее мы хотим подчеркнуть необходимость правильной интерпретации данных, полученных методом фазовой флуорометрии, при котором исследователям необходимо помнить, что измеряемыми величинами являются фазовые углы, но не времена затухания флуоресценции.
Интересно сравнить результаты, которые предположительно можно получить для одного и того же образца кинетическими и разностным фазовым методами. Такое сравнение сделано на рис. 6.12. Кинетические зависимости для анизотропии приведены слева. По мере уменьшения времени корреляции затухание г(г) ускоряется. Когда ф велико, r(t) затухает медленнее. Когда ф намного больше, чем т, и когда ф « т, tgA приблизительно
РИС. 6.12. Сравнение данных по вращательной диффузии, полученных кинетическими и разностным фазовым методами.
равен нулю. tgA достигает своего максимального значения, когда т и q> сравнимы по величине. Интересно, что наличие затрудненных вращеиий (гм) приводит к одинаковому уменьшению tgA в пределах всего диапазона значений ф. Значение tgAmax уменьшается приблизительно линейно с уменьшением г,*Л о до нуля [ 32]. Смысл такого уменьшения tgAmax с увеличением затруднений состоит в том, что затрудненные движения флуорофоров могут рассматриваться как движения, в ходе которых невозможно достигнуть максимальных значений tgA, предсказываемых уравнением (6.34).
6,3.3. влияние анизотропных вращений на tgA
Разностные тангенсы успешно используются для обнаружения анизотропных движений флуорофоров [23]. В основе методики лежит то Обстоятельство, что максимум tgA может быть предсказан из уравнения (6.34). является функцией величин rQ, со и т, каждая из которых легко измеряется. Влияние анизотропных деполяризующих вращений проявляется в уменьшении тангенса, т.е. в исчезновении равенства наблюдаемого значения tgA предсказываемому уравнением (Р.34). Сравнительные данные для изотропного и анизотропного вращеиий показаны на рис. 6.13. Приведенные значения tgA для DPR и перилена в прогшленгликоле иллюстрируют характерные особенности разностных тангенсов. Значения tg А приближаются к нулю как при низких, так и при высоких температурах. Увеличение частоты модуляции приводит к большим значениям разностных тангенсов, как и следует из теории, изложенной в уравнениях (6.27) - (6.34).
Деполяризующие вращения DPH изотропны, и, как и предполагается, наблюдаемые и вычисленные значения tgA равны. В противоположность этому, значения tgA для перилена существенно меньше, чем предсказываемые. Падение тангенса вызывается анизотропной вращательной диффузией дискооб-
РИС. 6.13. Сравнение разностных тангенсов для DPII и перилена.
Прямыми линиями показаны вычисленные значения tgA . (С разрешения авторов работ [ 23,33] и American Institute of Physics.)
Температура, °c
разной молекулы перилена. Эти результаты показывают, что на разностный пол яризационно-фазовый угол влияют различные скорости вращения флуорофоров.
6.3.4. Влияние затрудненных вращений на разностные тангенсы
Для случая затрудненного изотропного ротатора измерения tg Д могут быть использованы для вычисления степени затруднений, как это описывается гю . Зонд DPH, связанный с мембранами, попадает в этот класс. Значение tgA для затрудненного ротатора легко предсказать, используя разложение на синус и косинус импульсной функции отклика [24]., Эти функции могут быть получены из уравнений (6.6), (6.7) и (6.13):
Предыдущая << 1 .. 63 64 65 66 67 68 < 69 > 70 71 72 73 74 75 .. 185 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама