Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Другое -> Лакович Дж. -> "Основы флуоресцентной спектроскопии" -> 70

Основы флуоресцентной спектроскопии - Лакович Дж.

Лакович Дж. Основы флуоресцентной спектроскопии — М.: Мир, 1986. — 496 c.
Скачать (прямая ссылка): osnovifluriscentnoyspektroskopii1986.djv
Предыдущая << 1 .. 64 65 66 67 68 69 < 70 > 71 72 73 74 75 76 .. 185 >> Следующая

Подстановка (6.38) и (6.39) в уравнения (6.28) - (6.30) дает разностный тангенс для затрудненного ротатора:
^Ри гоо = 0 эти Уравнения упрощаются до выражений, соответствующих незатрудненному ротатору [уравнения (6.33) и (6.34)].
Интересной особенностью значений tg Д для затрудненного ротатора является то, что падение тангенса может быть значительно больше, чем это найдено для анизотропных вращений, для которых падение тангенса редко превышает 25% [23]. Напротив, затрудненное вращение может приво-
(6.39)
(6.38)
tg Д =
“т(го.~ 0<2/?т)
(6.40)
3
где (1 + 2 0(1 — О и 5=2 + г0-Гоа(4г0 - 1).
Максимальное значение tgA равно
Зшт(г0 - гм)
(6.41)
S -t- 2[ т0 им (1 + со2т2)]^
О 10 20 30 4О SO 60
Температура7 °с
О 20 40 60
Температура, °С
РИС. 6.14. Графические зависимости разностных тангенсов и предельных анизотропий от температуры для DPH в везикулах DMPC [ 34].
(© 1978, American Association for the Advancement of Science.)
дать к уменьшению тангенса на величину до 100%. Это видно из уравнения (6.41): ес-
ли roo ~ г о» то ь8дтах = Значительное уменьшение тангенса наблюдалось для DPH. в мембранах; эти данные были использованы для установления того, что DPH в липидных бислоях является затрудненным ротатором. Температурная зависимость значений tgA для везикул димиристоилфосфатидилхолина, маркированного DPH, приведена на рис. 6.14 [34]. Видно, что дри температуре фазового перехода значения tgA сильно возрастают. Однако максимальное значение (tgAmax) составляет только 57% от значения, ожидаемого для свободного изотропного ротатора. Еще большее снижение получено для везикул других липидов [33]«Падение слишком велико, чтобы оно было следствием вращательной анизотропии, и,, таком образом, его приписали затрудненному вращению флуорофора. Используя такие данные, можно рассчитать предельную анизотропию; вычисленные значения приведены На рис. 6.14. Результаты для точно соответствуют значениям, полученным из кинетических измерений г (г). Уравнения, необходимые для расчета гж , описаны в следующем разделе»
6.3.4.1. Вычисление скоростей вращения и значений Гоа из данных по разностям фаз
В липидных бислоях максимальное значение tgA наблюдается вблизи температуры перехода. Обычно хотят знать и скорость вращения зонда (Я), и степень, в которой это вращение затруднено (г^). Анализ уравнения (6.40)
показывает, что максимум tgA может быть результатом изменений либо R, либо . Следовательно,'значения tgA сами по себе не могут быть использованы для определения ни R, ни . Эта неопределенность может быть исключена при независимом определении стационарной анизотропии (г). Вычисление R и для затрудненного ротатора сравнительно сложное [ 33, 34], но легко автоматизируется. Скорость вращения получают из решения следующего квадратного уравнения:
(mtgA)(2/?-r)2 (СtgA ~ А) (2/?т) + (DtgA - В) = 0 (6.42)
где А = ЗВ - СОТ (г0 — г ); С = — (2г — 4г 2 + 2); D = —- (т + т^со 2т2);
3 ”
т - (1 +• 2г) (1 — г).
Обычно одно из значений R отрицательно и, следовательно, неприемлемо. Вычисленное значение R затем подставляют в уравнение (6.46) вместе со стационарной анизотропией для нахождения .
6.4. Измерения анизотропии при изменении времени затухания флуоресценции
В предыдущих разделах были описаны инструментальные средства для получения информации о кинетике затухания анизотропии. Такую информацию можно получить, не проводя временных измерений, если существует метод, в котором время затухания флуоресценции можно варьировать [35, 36]..Тушение флуоресценции при столкновениях дает именно такую возможность (гл. 9). Целый ряд молекул действуют как тушители при столкновении, например молекулярный кислород. В присутствии кислорода время затухания флуоресценции т равно
X = т0/(1 + К[0 23) (6.43)
где т 0 — время затухания в отсутствие тушителя; К - константа тушения при столкновениях. Тушение флуоресценции при столкновениях дает способ изменения т и, следовательно, среднего времени деполяризации. Стационарная анизотропия г(т) получается усреднением кинетики анизотропии, измеренной путем импульсного отклика, по отношению к общей интенсивности флуоресценции:
oo,
f r(t) е~ dt
г (т) = .------------- (6.44)
оо
Г e^/T dt
О
Предположим, что г (г) затухает до нуля одноэкспоненциально. Комбинация
г
0,20
0,1 в
0,0 <
0,06
0,12
0,08 0,16
0,24
О
0,1 о,г о,з о
РИС. 6.15. Графические зависимости анизотропии DPH в минеральном масле и в фосфолипидных везикупах ПМРС, полученные методом изменения времен затухания флуоресценции.
Предыдущая << 1 .. 64 65 66 67 68 69 < 70 > 71 72 73 74 75 76 .. 185 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама