Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Другое -> Лакович Дж. -> "Основы флуоресцентной спектроскопии" -> 94

Основы флуоресцентной спектроскопии - Лакович Дж.

Лакович Дж. Основы флуоресцентной спектроскопии — М.: Мир, 1986. — 496 c.
Скачать (прямая ссылка): osnovifluriscentnoyspektroskopii1986.djv
Предыдущая << 1 .. 88 89 90 91 92 93 < 94 > 95 96 97 98 99 100 .. 185 >> Следующая

8.7.2. Фазово-модуляционные измерения спектральной релаксации в мембранах
Методы измерения фазовых сдвигов и степени демодуляции флуоресценции также были использованы для регистрации зависящих от времени спектральных сдвигов в меченых мембранах [33]. Таких данных значительно меньше, чем результатов, полученных импульсным измерением кинетики затухания, но в основном оба метода согласуются между собой. На рис. 8.21 изображены графические зависимости кажущихся фазовых тр и модуляционных тт времен затухания флуоресценции для TNS , растворенного в глицерине и связанного с везикулами диолеил-ь-а-фосфатидилхолина. Было найдено, что на длинноволновом краю спектра испускания т Р > тщ. Это соответствует появлению члена с отрицательным предэкспоненЦиальным множителем в законе затухания (см. рис. 8.17) и свидетельствует о том, что про-
I
X
S 8 t
1
й
I 0 | 10
Длина Волны, нм
РИС. 8.21. Графические зависимости времен затухания от длины волны и спектры флуоресценции TNS I 33].
Кажущиеся значения фазовых и модуляционных времен затухания измерены при 30 МГц. Сплошной линией показаны нормированные спектры испускания TNS в глицерине и связанного с везикулами UOPC, штриховой — TNS в риоксане при 25 "С.
Ш'с.г, протекающий в возбужденном состоянии, по крайней мере частично, является причиной испускания с длинами волн '* 500 нм. Гетерогенность основного состояния может также проявиться в зависимости времен затухания от длины волны, однако в этом случае т^ всегда будет меньше, чем тт (гл. 12). Таким образом, фазовые и модуляционные данные свидетельствуют
о том, что протекает процесс в возбужденном состоянии и что зависимость времен затухания от длины волны не обусловлена присутствием смеси флуорофоров в разных состояниях с разными временами затухания. Отметим, что в этаноле не наблюдалась зависимость времен затухания от длины волны, поскольку в зтом растворителе релаксация происходит намного быстрее, чем испускание. То же наблюдается в неполярном диокеано, где пет заметной релаксации.
8.7.3. Спектры испускания с различными временами затухания флуоресценции, полученные для меченых мембран
В двух предыдущих разделах были обсуждены зависящие от времени спектральные сдвиги Для связанных с мембранами флуорофоров, полученные как импульсным, так и фазово-модуляционным методами. По спектрам испускания с различными временами затухания, наблюдаемым при тушении флуоресценции кислородом, можно количественно оценить скорости релаксации другим способом. Путем тушения можно уменьшить время жизни возбужденного состояния, что приведет к понижению среднего времени релаксации растворителя [ уравнение (8.5)]. На рис. 8.22 приведены стационарные спектры образцов с потушенной и непотушенной флуоресценцией, представляющих собой помеченные TNS мембраны. Видно, что при уменьиепии среднего времеии затухания от 6,7 до 0,53 не стационарные спектры смещаются на 13 нм в сторону коротких длин волн. Тушение флуоресценции происходит при случайных столкновениях молекул TNS и кислорода. С большей вероятностью тушению подвергаются те молекулы, которые дольше находятся в возбужденном состоянии. Большее время затухания имеют те флуорофоры, окружение которых отрелаксировало более полно. Наличие процесса тушения селективно препятствует возможности наблюдения флуоресценции таких сильнее отрелаксиро-
О 380 ПО 480 $00 $40 $80
Длина волны, нм
РИС. 8.22и Графическая иллюстрация влияния тушения кислородом на спектры испускания флуоресценции везикул смеси ЮМРС+ холестерин (3 : 1), помеченных TNS [34],
Вертикальными сплошной и штриховой линиями отмечены центры тяжести спектров испускания (v ^.) В нанометрах. (С разрешения American Chemical Soeir-ty.)
время затуи:амия флуоресценции , не
РИС. 8.23. Мгновенные положенин центров тяжеоти спектров испускания везикул смеси DMPC + холестерин Г 34].
(С разрешения American Chemical Society.)
вивших флуорофоров. В результате этого спектр испускания смещается в сторону коротких длин волн.
Зависящие от времени затухания спектры можно использовать для измерения времен спектральной релаксации (рис* В.23). Сплошными линиями, проведенными через экспериментальные точки, показано наилучшее совпадение, полученное при использовании уравнения (В.5). Интересно отметить, что все времена релаксации попадают в узкий интервал 8,6 — 0,46 но в зависимости от химической структуры мембран. Более того, в данном случае зависимость времен спектральной релаксации от температуры менее ярко выражена, чем температурная зависимость анизотропии флуоресценции. г)то, вероятно, связано с различием молекулярных процессов, необходимых для деполяризации флуоресценции и для спектральной релаксации. Кроме того, молекула TNS локализована па поверхности раздела липидная фаза/вода в мембране. Напротив, типичные зонды микровязкости локализованы на жирных цепочках мембран-
8.7.4. Спектральная релаксация в меченых белках
Изучению процессов спектральной релаксации в белках посвящено гораздо меньше работ, чем -мембранам, к тому же эти работы охватывают меньшее число проблем. Приведем краткий обзор полученных результатов. Бранд с сотр.
Предыдущая << 1 .. 88 89 90 91 92 93 < 94 > 95 96 97 98 99 100 .. 185 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама