Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Другое -> Лакович Дж. -> "Основы флуоресцентной спектроскопии" -> 95

Основы флуоресцентной спектроскопии - Лакович Дж.

Лакович Дж. Основы флуоресцентной спектроскопии — М.: Мир, 1986. — 496 c.
Скачать (прямая ссылка): osnovifluriscentnoyspektroskopii1986.djv
Предыдущая << 1 .. 89 90 91 92 93 94 < 95 > 96 97 98 99 100 101 .. 185 >> Следующая

измерили законы затухания флуоресценции TNS, связанной с бычьим сывороточным альбумином [ 35] и с апомиоглобином [36]. В последнем случае предполагалось, что зонд локализован в неполярной небелковой области, недоступной для внешнего растворителя [37]. В обоих случаях были построены мгновенные спектры испускания, и было обнаружено, что спектры испускания смешаются в длинноволновую область, при увеличении промежутки времени после момента возбуждения. Ми в одном из случаев не появились члены, содержащие отрицательные предэкопоненциальиые множители, - вероятно, по причине перекрывания спектров, соответствующих различным состояниям. Впоследствии для апомиоглобина, меченного TNS , было показано, что причиной зависимости времен затухания от длины волны являются реакции в возбужденных состояниях [ 38]. Найдено, что на длинноволновом краю спектра испускания
щ/COS ф > 1 •
Зависимость времен затухания от длины волны часто наблюдается для триптофановых остатков белковых молекул. В одном случае наблюдался член с отрицательным предэкспоненциальным множителем. Однако вклад в зависимость времен затухания белков от длины волны обусловливает также гетерогенность основного состояния. Подробнее эти результаты будут обсуждены в гл.11.
Задачи
8-1 .На рис. 8.24 приведены данные для 2-ацетил антрацен а в глицерине: температурная зависимость максимума спектра испускания (кривая 1) и разность фазовых углов Аф между коротковолновой и длинноволновой частями спектра (кривая 2).
а) Объясните ход температурной зависимости vmax «
б) Объясните ход температурной зависимости Аф.
16
18 ••
Я
20 В 2Z
Температура, °С
РИС, 8.24. Максимумы испускания и разности фаз для 2-ацетилантрацена в глицерине [ 21].
1 - температурная зависимость положения максимумов испускания; 2 - разность фазовых углов между коротковолновой и длинноволновой частями спектра испускания. частота модуляции 12,6 МГц.
в) В предположении, что на измеряемые величины Дф перекрывание спектров не влияет, объясните, что представляет собой собственное время жизни состояния R (то/?). тоЛ — время жизни релаксированного состояния, когда оно быпо получено при непосредственном возбуждении. Более полное определение приводится в гл. 12.
8-2. Используйте данные рис. 8.17 для расчета времени спектральной релаксации мембран, меченных TNS. Предположите, что при 390 нм преобладает испускание из исходного возбужденного состояния F и что испускание при 435 нм представляет собой полное испускание, не затронутое релаксацией.
ГЛАВА9. Тушение флуоресценции
Тушением флуоресценции называют любые процессы, которые умонммп-ют интенсивность флуоресценции данного вещества. К тушению может проводить множество процессов, в том числе реакции в возбужденном состоянии, перенос энергии, образование комплексов и тушение при столкновениях. Эта глава посвящена главным образом тушению, связанному со случайными столкновениями между флуорофором и тушителем, которое называется динамическим, или тушением при столкновениях. Мы также рассмотрим статическое тушение, которое связано с образованием комплекса. Статическое тушение часто является осложняющим фактором в анализе динамического тушения. В дополнение к процессам, упомянутым выше, может встречаться кажущееся тушение вследствие оптических свойств образца. Например, высокая оптическая плотность или мутность могут приводить к уменьшению интенсивности флуоресценции. Это тривиальный тип тушения, который несет мало информации о молекулярных процессах. В данной главе предполагается, что не чти тривиальные эффекты определяют наблюдаемые изменения интенсивности флуоресценции.
Тушение флуоресценции широко изучено как в теоретическом аспекте, так и в приложении флуоресценции к биохимическим проблемам, причем приложения связаны со свойствами процесса тушения. Для тушения (и статического, и динамического) требуется контакт между молекулами флуорофора и тушителя. В случае динамического тушения тушитель должен диффундировать к флуорофору в течение времени нахождения в возбужденном состоянии. В результате контакта флуорофор возвращается в основное состояние без излучения фотона. В случае статического тушения между флуорофором и тушителем* образуется комплекс, который не флуоресцирует. В любом случае, чтобы произошло тушение, флуорофор и тушитель должны контактировать. Это -основное требование, которое проявляется в различных приложениях тушения. Например, измерением тушения можно выявить доступность флуорофоров для
*
В основном состоянии, до поглощения возбуждающего флуоресценцию фотона.
— Прим, ред.
тушителей. Если данный растворитель очень вязок, то диффузия замедляется и тушение ослабевает. Следовательно, изучив тушение, можно определить скорости диффузии тушителей. Предположим, флуорофор связан либо о белком, либо с мембраной. Коли белок или мембрана непроницаемы для тушителя и флуорофор локализован внутри макромолекулы, то не может быть ни динамического, пи статического тушения. Исходя из этих соображений, тушение можно использовать для выяснения локализации флуорофоров в белках и мембранах и их проницаемости для тушителей.
Предыдущая << 1 .. 89 90 91 92 93 94 < 95 > 96 97 98 99 100 101 .. 185 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама