Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Другое -> Лакович Дж. -> "Основы флуоресцентной спектроскопии" -> 97

Основы флуоресцентной спектроскопии - Лакович Дж.

Лакович Дж. Основы флуоресцентной спектроскопии — М.: Мир, 1986. — 496 c.
Скачать (прямая ссылка): osnovifluriscentnoyspektroskopii1986.djv
Предыдущая << 1 .. 91 92 93 94 95 96 < 97 > 98 99 100 101 102 103 .. 185 >> Следующая

Из-за того, что многие вещества могут действовать как тушители, часто можно легко подобрать комбинацию флуорофор — тушитель для решения поставленной 'задачи. Важно отметить, что не все флуорофоры тушатся любыми перечисленными выше веществами. г>гот факт иногда можно использовать для селективного тушения определенного флуорофора. Эффект тушения зависит от его механизма, обусловленного структурой индивидуальных молекул. Детальный анализ механизма тушения сложен. В от ой главе мы займемся главным образом природой явления, т.е. выяснением того, является ли природа тушения динамической или статической. В последней части главы будет приведено несколько наиболее информативных биохимических приложений оффекта тушения,
9.2. Теория динамического тушения
Динамическое тушение флуоресценции описывается уравнением Штерна -Фольмора:
F /F* 1 + k т [Q\ = W К [Q] (9.1)
O' q О ДИН ' 7
где F и F - интенсивности флуоресценций в отсутствие и в присутствии тушителя соответственно; к - биомолекуляриая константа скорости тушения; tq - время затухания флуоресценции в отсутствие тушителя; [С/] - концентрация тушителя; - к tq - штерн-фольмеровская константа тушения. Данные 1ю тушению обычно представляют в координатах F /F от [ Q], поскольку F /F, как ожидается, должно линейно зависеть от концентрации тушителя, [’рафик дает отсекаемый отрезок на оси у, равный единице, и наклон, равный К (Рис* У- 0- Полезно отметить, что равна концентрации тушителя, при которой F /F 2, т.е. тушится 50% интенсивности флуоресценции. Прямолинейная зависимость в координатах Штерна - Фольмора обычно указывает на существование в растворе одного типа флуорофоров, одинаково доступных для тушителя .Кили присутствуют два типа флуорофоров и один из них недоступен для тушителя, то штерн-фольмеровский график отклоняется от линейности в сторону оси х. Такой результат часто встречается при тушении флуоресценции триптофана в белках полярными или заряженными тушителями.
Г>ги молекулы с трудом проникают внутрь гидрофобных белков и тушат только остатки триптофана на поверхности белка*
Динамическое тушение ........"У" (F*)
М)
Г-г-
jS'Q
кя Св] ^а
более высокая температура
//Наклон*k дин
J___I___I__I__I___I--1--L
С?П
Статическое тушение F* (F’Q)"
I
Г »r,
hv
0 без испускания
«сг *
F + Q ^ F-Q
CQ3
РИС. 9.1. Сопоставление динамического и статического тушения.
Важно знать, что линейность, наблюдаемая в координатах Штерна - Фоль мера, еще не доказывает, что происходит динамическое тушение флуоресценции. В последующих разделах (разд. 9,3) будет показано, что статическое тушение также дает прямую линию в координатах Штерна - Фольмора. В общем случае различить статическое и динамическое тушение можно но их зависимости от температуры и вязкости или, что более предпочтительно, по измерению времени затухания флуоресценции.
9.2.1. Вывод уравнения Штерна — Фопьмера
Уравнение Штерна - Фольмера может быть выведено несколькими способами. Прежде всего рассмотрим интенсивность флуоресценции в отсутствие и в присутствии тушителя,, Интенсивность флуоресценции, наблюдаемая для флуорофора, пропорциональна его концентрации в возбужденном состоянии F*. При непрерывном облучении устанавливается стационарная концентрация возбужденных флуорофоров и, следовательно, d[F*] /dt = 0„ В отсутствие и в присутствии тушителя дифференциальные уравнения, описывающие F* представляются в виде
d[F*]/dt = /(f) ~ Г[ F*] = 0 (9.2)
d[F*]/dt -/(«)-(Г f y.Q])[F*)c= 0
(9.3)
где /(f)- постоянная функция возбуждения флуоресценции, которая легко
исключается из птих уравнений, Г = т"1 представляет собой константу скорости дезактивации флуорофора в отсутствие тушителя. Из уравнений (9.2) и
(9.3) получаем уравнение Штерна - Фольмера
f0 г, у а 1
« Ukqr0[Q] (9.4)
Г
Это уравнение может быть также выведено путем рассмотрения доли возбужденных флуорофоров, дезактивирующихся путем излучения, по отношению к общему числу возбужденных флуорофоров. Доля F /F определяется отношением скорости затухания Г флуоресценции к общей скорости затухания в присутствии тушителя (Г ь А [Q]):
Р г 1
— - .....________ (9.5)
'¦'о 1 + K„„„[Q1
Это выражение также является уравнением Штерна - Фольмера.
'Гак как динамическое тушение - конкурирующий процесс, который дезактивирует возбужденное состояние, время затухания в отсутствие (т ) и в присутствии (т) тушителя дается выражениями
т0 Г"1; т . (Г+у Q])"1 (9.6), (9.7)
и,следовательно, tq/t « 1 +¦ A t0[Q]. (9,8)
Последний вывод иллюстрирует важную характеристику динамического тушения, которая состоит в одинаковом уменьшении интенсивности и времени затухания флуоресценции (рис. 9Л):
Предыдущая << 1 .. 91 92 93 94 95 96 < 97 > 98 99 100 101 102 103 .. 185 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама