Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Другое -> Лакович Дж. -> "Основы флуоресцентной спектроскопии" -> 99

Основы флуоресцентной спектроскопии - Лакович Дж.

Лакович Дж. Основы флуоресцентной спектроскопии — М.: Мир, 1986. — 496 c.
Скачать (прямая ссылка): osnovifluriscentnoyspektroskopii1986.djv
Предыдущая << 1 .. 93 94 95 96 97 98 < 99 > 100 101 102 103 104 105 .. 185 >> Следующая

9.3. Теория статического тушения
В предыдущем разделе рассматривалось тушение, связанное с диффузионными столкновениями между флуорофором и тушителем в течение времени жизни возбужденного состояния, - процесс, зависящий от времени. Тушение может также происходить в результате образования нефлуоресцирующего комплекса в основном состоянии между флуорофором и тушителем. Как только произошло поглощение света, комплекс немедленно возвращается в основное состояние без испускания фотона (рис. 9.1)»
Зависимость интенсивности флуоресценции от концентрации тушителя легко вывести, используя константу ассоциации комплекса, записываемую еле-
дующим образом:
[F -Q]
К i(9.14) °т [РНШ
где [F -Q] - концентрация комплекса; [F] - концентрация несвязанного флуорофора» Если закомплексованная форма не флуоресцирует, то доля оставшейся флуоресценции (F/Fq) определяется той частью от общего количества флуорофоров, которая не закомплексована (/), т.е. / -¦= F/F . Общая концентрация флуорофора [ Fq) равна
Г*0]« [F1+.[F~G\. (9.15)
Подстановка в (9.14) дает
[FA-iF] [F0] 1
Кт=.—--------*--------— (9.16)
ст Г F1Г Q] [F][Q] [Q]
Концентрации флуорофора можно заменить на интенсивности флуоресценции и преобразовать выражение (9.16) к виду
F/F- 1+-К [Q] (9.17)
о ст
Отметим, что зависимость FQ/F от [Q] идентична зависимости, получаемой для динамического тушения, за исключением того, что константа скорости тушения здесь заменяется константой ассоциации. Данные по тушению флуоресценции, полученные по измерению интенсивности в случае, если нот дополнительной информации, можно объяснить либо динамическими, либо статическими процессами. Для идентификации статического и динамического тушения можно использовать времена затухания или зависимость тушения от температуры или вязкости. Измерение времени затухания флуоресценции - наиболее четкий метод для различения статического и динамического тушений. Из-за статического тушения часть флуорофоров не наблюдается. Связанные в комплекс флуорофоры не флуоресцируют, и наблюдается флуоресценция только несвязанных флуорофоров. Me связанная в комплекс часть флуорофоров не возмущена, и, следовательно, для нее время затухания равно т . Таким образом, для статического тушения tq/t = 1 (рис. 9.1), в то время как для динамического тушения F /F - то/т.
СРАВНЕНИЕ СТАТИЧЕСКОГО И ДИНАМИЧЕСКОГО ТУШЕНИЯ. ОТЛИЧИ© ста-тического тушения от динамического часто может быть установлено не только измерением времен затухания, но и путем рассмотрения других факторов. Динамическое тушение зависит от диффузии. Поскольку повышение температуры приводит к увеличению коэффициентов диффузии, можно ожидать, что бимолекулярная константа скорости тушения возрастет с увеличе-
нием температуры (рис. 9.1), Точнее, следует ожидать, что к будет пропорциональна Т/я, так как коэффициенты диффузии пропорциональны этому отношению [ уравнения (9.13)1. Напротив, при росте температуры скорее всего уменьшается стабильность комплексов и тем самым значения констант статического тушения.
Еще одним дополнительным методом для отличия статического тушения от динамического может служить тщательный анализ спектра поглощения флуорофора. Динамическое тушение влияет только на возбужденные состояния флуорофоров, и можно полагать, что оно но изменит спектры поглощения» В противоположность 'ггому образование комплекса в основном состоянии часто приводит к возмущению спектра поглощения флуорофора.
9.4. Смешанное динамическое и статическое тушение
Во многих случаях флуорофор может быть потушен за счет как столкновений, так и образования комплекса с тушителем. Характерная особенность графика Штерна - Фольмера в таких случаях - отклонение вверх и вогнутость по отношению к оси у (рис. 9.2). Остаточная флуоресценция {F/Fq) определяется произведением доли, не связанной в комплекс (/), и доли, не потушенной диф-
I
Не флуоресцирующий
I
F-Q
РИС. 9.2. Графические зависимости для смешанного динамического и статического тушения флуорофоров одного вида.
фузионными столкновениями. Следовательно,
F г
—-/-------------- (9.18)
F0 г+-у<21.
В предыдущем разделе было показано, что /~1 = 1 + KCT[Q]. Инверсия уравнения (9.18) и перестановка в правую часть последних членов дает
Fq/F- (W:KfiJQ])(b:KCT[Q]) (9.19)
Эта модифицированная форма уравнения Штерна - Фольмера является уравнением второго порядка относительно [ Q], что объясняет изгиб графика кверху, наблюдаемый, когда флуорофор одновременно тушится как по статическому, так и по динамическому механизму.
Доля динамического тушения в наблюдаемом уменьшении флуоресценции может быть определена по изменению времен затухания, т.е. но зависимости tq/t = 1 + К [ Q]. Если таких данных нет, то уравнение (9.19) может быть преобразовано для графического определения Кст и ^дин* После перемножения членов в скобках получится
Предыдущая << 1 .. 93 94 95 96 97 98 < 99 > 100 101 102 103 104 105 .. 185 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама