Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 2" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 1" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 12" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 11" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 10" (Журналы)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Другое -> Зеймаль Э.В. -> "Мускариновые холинорецепторы" -> 26

Мускариновые холинорецепторы - Зеймаль Э.В.

Зеймаль Э.В., Шелковников С.А. Мускариновые холинорецепторы — Л.: Наука, 1989. — 289 c.
ISBN 5-02-025768-0
Скачать (прямая ссылка): muskarinovieholinoreceptori1989.djvu
Предыдущая << 1 .. 20 21 22 23 24 25 < 26 > 27 28 29 30 31 32 .. 108 >> Следующая


І W PJ

Когда к 1ІА] !>]«}(_, [/IP], -h^MpJ.

-к dt.

откуда

LAPJ -11 ^

Интегрирование дает уравнение 1лг r.p1 OO

MrJp

где [АРJ^ - концентрации связанного лиганда в каждый данный момент времени t , a [/iPjp - исходная (равновесная) концентрация связанного пиганда.

Еспи нанести по оси абсцисс время і , а по оси ординат в

IAPlt

логарифмической шкале отложить отношение v , то наклон

L Л PJ р

примой равен-J<_i (рис. 15, Б).

Полувремя диссоциации рассчитывают из преобразованного уравнения (11)

t]/2 = 1^(2)/^. (12)

3.1.3. Конкурентное вытеснение меченого пиганда

Этот непрямой метоп исследования имеет то преимущество, что с помощью одного меченого пиганда можно охарактеризовать связывание целого ряда конкурирующих с нам немеченых гшгандов, т. е. найти константы их взаимодействии с рецепторами (Ka), а также определить коэффициент Хиппа. Немеченый лиганд, добавляемый к пробе, в которой происходит взаимодействие меченого лиганда с рецепторами, вступает в соединение с репепторами и благодаря этому число рецепторов, доступных аля взаимодействия с меченым лигандом, уменьшается. Это приводиг к сдвигу равновесия реакции (1) влево, в сторону распада комплекса меченый лиганд-рецептор. Добавляя возрастающие концентрации немеченого пиганда и измеряя при этом копичество меченого лиганда, остающегося связанным с репепторами, можно построить кривую вытеснения меченого лиганда немеченым и найти из нее концентрацию немеченого лиганда, при которой в данных условиях опыта вытесняются 50% меченого лиганда (СГСдй). Чем больше сродство немеченого пиганда к рецепторам, тем меньще его 7CgQ. На основании JC^q может

70 быть высчитана константа диссоциации конкурирующего вещества Ka , которую называют также константой ингибирования К , по следующей формуле (Cheng, Prusoff, 1973); и

7С50

и=ТТш' (13)

Ka

где [Н] - концентрация свободного меченого пиганда, а _ равновесная константа диссоциации меченого пиганда, определяемая из графика Скетчарда.

3.2. Связывание антагонистов и агонистов с мускариновыми холинорецепторами

Б табл. 6 показано содержание M-XP в разных тканях, выявленное при изучении связывания [^Н}ХНБ. Связывание веществ с M-XP рассмотрено-в ряде обзоров (Birdsall, Hulme1 1976, 1983; Heilbronn1 Bartfai, 1978; Ehlert et ab, 1980, 1981, 1982; Wastek1 Yamamura1 1981; Sokolovsky et al„ 1983; Vickroy et al., 1984b).

3.2.1, Связывание антагонистов с мускариновыми хопинорецепторами

Способность M-XP связывать меченые лигандьг изучалась сначала главным образом с помощью меченых антагонистов. Связывание антагонистов легче исследовать, чем связывание агонистов, так как сродство антагонистов к рецептору больше. Поскольку комплекс антагонист-рецептор диссоциирует медленно, он практически не успевает распадаться за время фильтрации и центрифугирования, предназначенных, чтобы отлепить свободный пиганд от связанного, и поэтому не вносится искажений в определение концентрации комплекса меченый антагонист-рецептор. Кроме того, высокое сродство к рецепторам позволяет использовать антагонисты в сравнительно низких концентрациях, связывающихся преимущественно с М-ХР, так что неспецифическое связывание не вносит серьезных осложнений.

Связывание мускариновых антагонистов с гомогенатами различных тканей отвечает основным критериям, позволяющим утвержцать, что места их связывания представляют собой М-ХР, К этим критериям относятся следующие,

! ) Меченые M-антагонисты связываются с высоким сродством, причем их специфическое связывание насыщается уже при низких концентрациях (см. рис. 13, А и Ь),

2) Вещества, эффективно взаимодействующие с M-XP в фармакологических опытах, способны подавить связывание меченых М-антагонистов, тогда как вешества, не действующие на М-ХР, на связывание не влияют (Yamamura, Snyder, 19 74а; Fields et al., 1978; Kloog et al., 1979a, и др. ). Ko-

71 Таблице 6

Содержание мускариновых холинорецепторов в разных тканях (максимальное специфическое связывание LjHJXHB)

Ткань Содержание M-XP (фмопи/мг белка) Литература
Гладкие мышцы: Ehlert el al., 1980
подвздошная кишка крысы 370
мочевой пузырь морской 320 Nilvebranl, Spart, 1983
свинки
миометрий кролика 440 Crankshow, 19B4
радужка кролика 2201 Kloog et al., 1979b
ушная артерия кролика 88 Hynes el al., 1986
Легкие кролика 83 Bloom el al., 1987
Базальная мозговая артерия 1500 Vanderheyden el al.,
быка 1986
Сердце: Fields et al., 1978
морская свинка 178
251 Uchida el al., 1984
крыса 190 Cavey el al., 1977
144 Fields el al„ 1978
371 Wei, Sulakhe, 1980b
собака 317 Uchida et al., 19Є4
цыппеиок (культура клеток) 194 Galper, Smith, 1980
лягушка (левое предсерцие) 841 Hartzell. 1980
Экзокринные железы крысы:
диспергированные ацянарные
кпетки 9
поджелупочнан железа 26 400 21 4002 Hootman et al., 1985
околоушная слюнная железа Та же
спезнан железа 25 7002 Hootman et al., 1985
околоушная слюнная железа 380 Nilvebrant, Spart, 1982
Эннакринные железы:
надпочечник быка 162 Yamanaka et al., 1986b
Предыдущая << 1 .. 20 21 22 23 24 25 < 26 > 27 28 29 30 31 32 .. 108 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама