Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 2" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 1" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 12" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 11" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 10" (Журналы)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Токсикология -> Марков И.В. -> "Клиническая токсикология детей и подростков Часть 2" -> 271

Клиническая токсикология детей и подростков Часть 2 - Марков И.В.

Марков И.В. Клиническая токсикология детей и подростков Часть 2 — Интермедика, 1999. — 400 c.
ISBN 5-89720-005-Х
Скачать (прямая ссылка): klintoksikologiya1999.djvu
Предыдущая << 1 .. 265 266 267 268 269 270 < 271 > 272 273 274 275 276 277 .. 280 >> Следующая

3) Снимают спектры гемолизатов А и В в диапазоне от 510 до 600 нм. Контроль — вода с
3 мг дитионита.
СОНЬ имеет максимумы поглощения при 541 и 571 нм. Дезоксигемоглобин имеет максимум поглощения при 557 нм.
4) Затем на миллиметровой бумаге откладывают по вертикальной оси величины оптической плотности, по горизонтальной оси —
длины волн (нм) и чертят две кривые. На этом графике (см. рис. 52) отмечают длину волны, при которой расстояние между кривой карбоксигемоглобина и кривой дезоксигемоглобина наибольшее — 538 нм, и длины волны, соответствующие точкам пересечения обеих кривых на графике — 550 нм, 565 нм, 580 нм (изобес-тические точки). (Расположение обозначенных точек специфично для каждого спектрофотометра, и длины волн могут не совпадать с указанными в примере.) Для дальнейших расчетов используют первую точку пересечения двух кривых — 550 нм. Измеряют оптическую плотность растворов А и В на указанных длинах волн — 538 нм и 550 нм. Определяют коэффициент К.
К =
Р538в—D538 а D550
D538b — оптическая плотность раствора В, насыщенного СО, при длине волны 538 нм; • D538a — оптическая плотность раствора А с дитионитом при длине волны 538 нм;
D550 — оптическая плотность в изобести-ческой точке при длине волны 550 нм.
Пример расчета К: если D538b = 2; D538a = 1,5,
то
388
9. ОСОБЕННОСТИ ХИМИКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ В НЕОТЛОЖНОЙ ТОКСИКОЛОГИИ
650 500 550 500
<— Х(НМ)
Рис. 54. Спектр поглощения цианметгемоглобииа pH 7,4 (Кушаковский М. С. Клинические формы повреждения гемоглобина, Л., 1968.) D — оптическая плотность; X — длина волны (нм)
К =
D538B—D538a 2-1,5
D550
1,8
0,28.
•COHb% - 100 —
(D538b-D538a) ' 100 D550A • К
При определении концентрации СОНЬ в крови обследуемого больного готовят гемолизат (0,1 мл крови развести в 10 мл 0,4% раствора аммиака), помещают его в кювету и измеряют оптическую плотность при 538 нм (контроль — вода), затем в эту кювету и в контроль прибавляют 3—4 мг дитионита натрия, перемешивают и через 5 минут измеряют оптическую плотность при 538 нм и при 550 нм.
Концентрацию СоНЬ рассчитывают по формуле:
D538b — оптическая плотность гемолизата крови больного при 538 нм.
D538a — оптическая плотность гемолизата крови больного с дитионитом при 538 нм.
D550a — оптическая плотность гемолизата крови больного с дитионитом при 550 нм.
К — коэффициент (см. выше).
Пример расчета СОНЬ: если D538b = 1,99; D538a = 1,55; D550a = 1,8; К = 0,28 то:
СОНЬ% = 100 —
(1,99-1,55)* 100 1,8-0,28
= 12,7%.
7.2. Определения метгемоглобина спектрофотометрическим методом
У здорового человека в крови обнаруживают — 1—3% метгемоглобина (MetHb). У больного с концентрацией MetHb равной 30% и менее через 3 дня-уровень MetHb нормализуется.
Реактивы. 1) Буфер pH 6,6 (приготовление реактивов см. стр. 357).
2) а. 10,0 г NaCN растворить в 100 мл воды,
б. 12,0 г конц. уксусной кислоты растворяют в 100 мл воды.
Сливают равные объемы растворов «а» и «б». Смесь используют в течение одного часа.
(Вместо реактива — 2 может быть использован 10% раствор ацетонциангидрина.)
3) 20,0 г K3Fe(CN)6 растворяют в 100 мл НгО.
1. В 25 мл буфера pH 6,6 вносят 0,5 мл крови, получают разведение 1 : 50, через 5 минут смесь центрифугируют. 3 мл полученного гемолизата вливают в кювету.
389
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПАТОЛОГИЧЕСКИХ ФОРМ ГЕМОГЛОБИНА
а) Измеряют оптическую плотность гемолизата на спектрофотометре при длине волны 630 нм (А() — максимуме абсорбции метгемоглобина при pH 6,0—7,0, контроль — вода.
б) К гемолизату в кювету добавляют 1 каплю раствора NaCN (реактив 2) для превращения метгемоглобина в цианметгемоглобин, максимум абсорбции которого лежит в интервале 500-550 нм (рис. 54).
К контролю в кювету тоже добавляют 1 каплю раствора NaCN (реактив 2), смесь перемешивают. Через 2 минуты, снова замеряют оптическую плотность при длине волны 630 нм — (Аг). (Примечание: в этом случае и далее вместо 1 капли раствора NaCN в кюветы может быть добавлена 1 капля 10% раствора ацетон-циангидрина. М. С. Кушаковский, Л., 1968.)
2. К другим 10 мл гемолизата приливают 0,5 мл раствора K3Fe(CN)6. При этом весь гемоглобин в пробе превращается в метгемогло-бин (рис. 54)’
Через 2 минуты часть этого раствора переливают в кювету.
а) Измеряют оптическую плотность при 630 нм (Аз), контроль — вода.
б) В эту кювету и в кювету с контролем вносят по 1 капле раствора NaCN (реактив 2), для превращения метгемоглобина в цианметгемоглобин.
Через 2 минуты снова замеряют оптическую плотность при длине волны 630 нм (А4).
Расчет по формуле:
%MetHb = 4^-100.
А3-А4
9. ОСОБЕННОСТИ ХИМИКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ В НЕОТЛОЖНОЙ токсикологии
Список основной литературы к главе 9
Предыдущая << 1 .. 265 266 267 268 269 270 < 271 > 272 273 274 275 276 277 .. 280 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама